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Alvarez Zaldivar, Ernesto

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Alvarez Zaldivar

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Ernesto

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Ernesto Alvarez Zaldivar

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  • PublicaciónAcceso Abierto
    Validación parcial de técnicas analíticas para la cuantificación de metabolitos en la etapa de fermentación de la vacuna Porvac
    (Universidad Central "Marta Abreu" de Las Villas, 2022) Alvarez Zaldivar, Ernesto
    El cultivo de células HEK293 transformadas que expresan la proteína E2CD es realizado en el CIGB Camagüey para la obtención del Ingrediente Farmacéutico Activo (IFA) de la vacuna Porvac. El control analítico es una debilidad que posee el proceso en cuanto al conocimiento y control de la dinámica de consumo y expresión de metabolitos que tienen una incidencia directa sobre la viabilidad celular y la expresión de proteína específica (E2CD) en el proceso de fermentación. En este trabajo se presentan los resultados de la validación de tres técnicas analíticas para cuantificación de lactato, amonio y azúcares reductores totales para su aplicación a muestras de cultivo celular del proceso de fermentación. Se validó el método de colorimetría con separación química previa en la cuantificación del metabolito lactato, el método analítico de DuBois (fenol-sulfúrico) en la cuantificación de azúcares totales y la cuantificación del metabolito amonio mediante la utilización del reactivo de Nessler. Durante la estandarización de estos ensayos se obtuvo una relación teórico-práctica entre estos tres analitos, conociéndose con mayor exactitud la dinámica de consumo o generación de los mismos durante el proceso. La validación de estas técnicas permitirá realizar estudios de control, seguimiento y modelación para futuras mejoras del proceso