Aislamiento y caracterización del gen que codifica para la enzima Isocitrato liasa de Mycosphaerella fijiensis Morelet
Fecha
2008-07-09
Autores
Ocaña Diaz, Bárbara
Título de la revista
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Título del volumen
Editor
Universidad Central "Marta Abreu" de Las Villas
Resumen
La raya negra de la hoja o SigatoKa Negra es producida por el hongo ascomiceto
Mycosphaerella fijiensis Morelet es la enfermedad más importante que ataca a la
superficie foliar de los plátanos y bananos. El objetivo del presente trabajo fue aislar el
gen que codifica para la enzima Isocitrato liasa de M. fijiensis y realizar su
caracterización mediante ensayos de expresión. Se aisló un fragmento de 1561 pb del
gen de la icl, empleando oligonucléotidos degenerados (ICL D e ICL R) diseñados a
partir de secuencias del gen de la icl de hongos relacionados filogenéticamente. Se
determinó el crecimiento y producción de conidios de M. fijiensis en medios con distintas
fuentes de carbono (sacarosa, glucosa, glicerol, etanol, acetato de potasio),
demostrándose que M. fijiensis es capaz de crecer en Medio Mínimo con 1% de glicerol
y etanol, con tasas de producción de masa seca superiores, en el caso de glicerol, a las
medias obtenidas en Medios Mínimos con glucosa y sacarosa al 1% y el etanol al 1 %
con una producción de masa seca superior al medio control PDB. Además se comprobó
la capacidad del hongo de producir conidios durante el cultivo en Medio Mínimo con
glicerol al 1% y Medio Mínimo con etanol al 1%, confirmándose la activación del ciclo
del glioxalato en presencia de estas fuentes de carbono. El análisis mediante RT-PCR
con oligonucleótidos específicos (ICL Mif D e ICL Mif R), confirmó la expresión del gen
de la icl de M. fijiensis en el Medio Mínimo con glicerol al 1% y en el Medio Mínimo con
etanol al 1 % en muestras de micelio a los 7 y 21 días de cultivo. Los resultados
obtenidos brindan elementos sobre la regulación del metabolismo de carbohidratos en
M. fijiensis y podrán contribuir al desarrollo de nuevas estrategias de control de la
enfermedad.
Descripción
Palabras clave
Musa, Mycosphaerella Fijiensis Morelet., Genes