Propagación in vitro de Stevia rebaudiana Bertoni a partir de ápices de plantas cultivadas ex vitro

Fecha

2018-05

Autores

González Hernández, Dionys

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Editor

Universidad Central "Marta Abreu" de Las Villas.Facultad de Ciencias Agropecuarias.Departamento de Biología

Resumen

Stevia rebaudiana Bertoni es una especie reconocida a nivel mundial por sus propiedades medicinales. Su cultivo y consumo se han incrementado, por el alto contenido de edulcorantes naturales no calóricos que presenta. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un protocolo de propagación in vitro de Stevia rebaudiana a partir de explantes ex vitro. Se procedió a realizar el establecimiento in vitro de ápices, para lo cual se evaluó el efecto de la concentración de hipoclorito de sodio y el tiempo de desinfección. Los brotes establecidos fueron transferidos a medio de cultivo de multiplicación, donde se determinó el efecto de los reguladores de crecimiento y el número de subcultivos sobre el coeficiente de multiplicación. Se evaluó la supervivencia de las plantas propagadas in vitro durante la fase de aclimatización ex vitro. Se compararon las plantas propagadas mediante corte de esquejes y las propagadas in vitro, empleando variables morfométricas y la técnica de RAPD. Se recomienda el empleo de hipoclorito de sodio al 1% durante 10-20 minutos para la desinfección de los explantes. La fase de multiplicación debe realizarse en medio de cultivo sin reguladores de crecimiento, durante cinco subcultivos cada 15 días. Es posible emplear diversas composiciones de sustrato durante la aclimatización ex vitro de las plantas propagadas in vitro. Estas desarrollaron mayor número de hojas y altura, que las propagadas convencionalmente. Ambos grupos mantienen la variabilidad genética intrínseca de la especie. El protocolo propuesto permite propagar in vitro plantas de S. rebaudiana en corto tiempo de manera sencilla.
Stevia rebaudiana Bertoni is worldwide known specie for its medicinal properties. Its cultivation and consumption have increased, due to the high content of non-caloric natural sweeteners. The aim of this work was to develop an in vitro propagation protocol of Stevia rebaudiana Bertoni from ex vitro explants. To in vitro establishment, the effect of sodium hypochlorite concentration and disinfection time on the survival of the explant was evaluated. The established shoots were transferred to multiplication culture medium. In which growth regulators and number of subcultures effects over multiplication coefficient were determined. The survival of in vitro plants was evaluated using different substrates on acclimatization stage. Then, the response of the in vitro propagated plants during the acclimatization phase was evaluated, in comparison with plants propagated by conventional cuttings using morphologic variables. The variability of both was compared using the analysis of random amplification patterns of polymorphic DNA segments. The use of 1% sodium hypochlorite for 10-20 minutes is recommended for the disinfection process. The multiplication must be carried out in culture medium without growth regulators, during five subcultures every 15 days at the most. It is possible to employ various substrate compositions during the acclimatization of micropropagated plants. These developed a greater number of leaves and height, than those propagated conventionally. Both groups maintain the intrinsic genetic variability of the specie. The proposed protocol allows the in vitro propagation of S. rebaudiana plants, easily, in a short time.

Descripción

Palabras clave

Aclimatización, Multiplicación, RAPD, Reguladores de Crecimiento, Growth Regulators, Stevia Rebaudiana

Citación